PAGE預混快速凝膠試劑盒

產品描述

本產品是在傳統的PAGE凝膠試劑盒的基礎上改良的一種新型蛋白電泳凝膠試劑盒。其特點是在不改變傳統使用習慣和蛋白質分子的分離環境的基礎上，改善了引發劑過硫酸銨的使用條件，實現了一步法灌膠，灌制下層膠后直接注入上層膠，無需液封，大大簡化了凝膠的制備方法，并提高了電泳的速度（室溫環境，加入正常比例APS，10-15min即可凝固），有利于獲得好的蛋白電泳實驗結果。

訂購信息

產品組分

u  下層膠為分離膠，上層膠為濃縮膠。

運輸與保存

常溫運輸。4℃保存，有效期12個月。【注】：過硫酸銨溶液分裝后-20℃保存。

使用方法（可參考文末簡圖）

1.試劑準備

(1)     10% 過硫酸銨（APS）溶液的配制：初次使用時，向APS試管中加入5 mL去離子水，輕輕搖勻混合，分裝存儲于-20℃，短期使用的置于4℃保存。【注】：若0.1g的APS則加入1mL去離子水即可。

(2)     下層膠混合液的準備：根據所使用的制膠模具，取所需量1/2體積的下層膠A液和下層膠B液于同一小燒杯（或試管）中混合均勻。【例】：使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽制膠時，按0.75/1.0/1.5 mm厚度的膠板，下層膠A液和B液分別取2.0/2.5/3.8 mL。

(3)     上層膠混合液的準備：另取一小燒杯，分別取所需量1/2體積的上層膠A液和B液，混合均勻備用。【例】：使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽時，按0.75/1.0/1.5 mm厚度的膠板，上層膠A液和B液分別取0.8/1.0/1.5 mL。

(4)     APS的加入：按1:100的比例，在步驟(2)和(3)中制備的下層膠和上層膠混合液中，分別加入10% APS溶液（即每1mL凝膠混合液中加入10μL的10% APS溶液）。輕輕攪拌混勻，避免產生氣泡。

2.灌膠操作

(1)     灌膠：將上一步準備好的下層膠混合液倒入凝膠模具中（如使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽時，凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5cm或距梳齒約0.5cm即可）。無需等待，可立即將已經準備好的濃縮膠混合液從左至右輕軟打入或倒入模具內，避免在一個位置大力度沖擊進入。

(2)     插梳與聚合：將梳子插入凝膠內，靜置10-15min，等待凝膠聚合。【注】：制備好的凝膠放入加有少量電泳緩沖液的密封袋中，可于4℃存放數周。

3.電泳操作

(1)     待凝膠聚合后，組裝電泳槽，加入電泳緩沖液，小心地拔出梳子，檢查膠孔并整理梳齒。

(2)     根據實驗需要加入蛋白樣品和蛋白分子量標準。

(3)     調整電泳儀為恒壓200V-300V，進行電泳操作，約25-35min完成蛋白電泳實驗。【注】：單板膠電流大于90mA，雙板膠電流大于130mA可以適當降低電壓。

注意事項

1.     本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.     本產品與傳統的SDS-PAGE有本質上的區別，請按產品說明書操作，操作視頻和預混膠分離圖譜示意圖可以參考GW或者聯系技術。

3.     灌注上層膠溶液時應操作輕緩，避免定點灌注，以防上層膠溶液過度滲入下層膠中。

4.     凝固后的膠，上下層膠的分界線平整度略低于傳統配制方法，但不影響后續電泳效果。

5.     配制的過硫酸銨應存儲于-20℃，若保存于4℃，建議1周內使用。

6.     試劑中含有Acr-Bis，該試劑有神經毒性，小心使用。

可制備凝膠數量

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